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#Actualités du secteur
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Cultures in vitro d'embryon
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Fécondation in vitro
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Effets d'en atmosphère contrôlée pour les cultures in vitro d'embryon.
L'étude de culture cellulaire représente actuellement un des champs d'application les plus importants et les plus prometteurs pour la science moderne et un du la plupart développé. Plusieurs des derniers accomplissements remarquables gagnés dans les domaines médicaux et biologiques résultés des chercheurs conduits sur les cellules laboratoire-cultivées. Afin d'obtenir les meilleurs résultats, des paramètres de culture doivent être exactement placés et commandé et l'importance du mélange de gaz pour le développement in vitro de cellules a été en particulier discutée dans un de notre note d'application précédente (lien). Ce travail vise à accentuer le rôle essentiel des mélanges de gaz en entreprenant des procédés de la fécondation in vitro (IVF), qui inclut l'étape critique de la culture d'embryon. Pour ces applications, MCQ suggère l'utilisation de sa série de mélangeur de gaz de MCQ, les instruments professionnels conçus pour jusqu'à 6 composants intoxiquent la gestion de mélanges.
Fertilisation in vitro.
La fécondation in vitro (IVF) et d'autres plusieurs techniques reproductrices aidées, ont été développées par la médecine moderne pour faire face aux problèmes rapportés pour coupler la stérilité. La stérilité femelle chez les femmes est principalement reliée aux problèmes avec la trompe utérine, alors que la stérilité masculine dérive en grande partie des hommes désertent la qualité de sperme. IVF est un processus sophistiqué conçu pour surmonter ces problèmes et pour aider des couples établissant une grossesse réussie. Fondamentalement, l'IVF implique de rechercher des oeufs des ovaires de la femme, de laisser le sperme les fertiliser dans un environnement contrôlé et de transférer les oeufs fécondés de nouveau dans l'utérus du patient. Cependant, sans techniques supplémentaires, ce processus simple fournirait de petites possibilités de grossesse. Afin d'augmenter l'indice de réussite du processus, d'autres étapes supplémentaires ont été développées et sont maintenant par habitude employées dans IVF :
• Hyperstimulation ovarien. Pendant un cycle 10-16 long des jours des injections ménopausiques humaines du Gonadotropin (HMG), le statut ovarien patient dans stimulé afin de réaliser la maturation simultanée de plusieurs oeufs.
• Récupération d'oeufs. Une fois que les follicules d'oeufs ont atteint une taille particulière (environ 16 millimètres de diamètre), le patient est prêt à subir la récupération d'oeufs. Le temps est un autre facteur important puisque la récupération doit être effectuée juste avant que l'ovulation se produise.
• Préparation d'oeufs. Des oeufs sont séparés des follicules liquides et puis stockés dans un incubateur dans des conditions physiologiques (les états de l'atmosphère et le mélange nutritif sont cruciaux pour le stockage et le développement corrects des cellules). Les oeufs resteront dans l'incubateur jusqu'à ce que la fertilisation soit prête à avoir lieu.
• Fertilisation. Le sperme et les oeufs sont placés dans des incubateurs qui permet à la fertilisation de se produire. Les oeufs sont surveillés pour confirmer cette fertilisation et la division cellulaire ont lieu. Une fois que ceci se produit, les oeufs fécondés sont considérés des embryons.
• Culture d'embryon. Des embryons sont laissés pour se développer pendant plusieurs heures, attendant la division cellulaire pour se produire. L'importance du mélange de gaz pendant la culture d'embryon sera discutée plus tard.
• Sélection d'embryon. Des embryons sont analysés et ceux pas en juste proportion développés sont rejetés. À ce stade, un diagnostic génétique de pré-implantation (PGD) peut sur option être conduit, pour vérifier n'importe quelle prédisposition possible aux maladies génétiques.
• Transfert d'embryon. Afin d'établir la meilleure condition pour l'implantation d'embryon, le patient est administré avec des oestrogènes et la progestérone. Une fois que la doublure utérine est convenablement préparée, les embryons choisis sont transférés à l'utérus du patient.
Culture d'embryon.
La culture d'embryon est essentielle au succès de n'importe quelle procédure d'IFV. Cette étape sensible implique le développement ou les oeufs fécondés dans des conditions fortement précises et commandées. Après la récupération, des embryons sont fertilisés et laissés se développer pendant 18 heures. Des embryons sont alors surveillés afin de choisir ceux dans lesquels le procédé de fertilisation a été réussi. Après la sélection, des embryons sont habituellement cultivés jusqu'à avoir atteint l'étape des cellules 6-8, trois jours après la fertilisation. Alternativement, des embryons peuvent être placés dans un système prolongé de culture, leur permettant de se développer jusqu'à l'étape de blastocyst (12-16 cellules, en général une culture longue d'une cinq) avant le transfert. La culture, aussi bien que la préparation de tous les médias et solutions à employer dans IVF, se produit à l'intérieur des capots spécialisés, en lesquels les paramètres de processus sont commandés et surveillés. Les facteurs principaux affectant des embryons sont : plats et stérilité de solutions (absolument requise pour éviter des contaminations de l'environnement), à milieu approprié de croissance (les substances exigées pour un développement correct peuvent changer selon l'étape d'embryon), température constante (maintenue à 37°C pour reproduire les conditions utérines optimales) et niveaux appropriés de dioxyde de carbone et de l'oxygène dans l'atmosphère de culture.
Effets de mélange de gaz.
La composition en mélange de gaz est particulièrement importante pour le développement correct des cellules cultivées. Même les petits changements dans la composition en atmosphère peuvent rigoureusement affecter les embryons et ainsi le processus entier d'IVF. La procédure standard de culture comporte la croissance des embryons dans des conditions physiologiques. Comparé à la valeur atmosphérique, la concentration en dioxyde de carbone est augmentée jusqu'à 5-6%, alors que la quantité de l'oxygène est variable. Dans les faits, l'effet de la concentration en oxygène sur les cultures in vitro est un sujet crucial, toujours discuté par la communauté scientifique. Une configuration à faible teneur en oxygène de mélange de gaz (O2 de 5% et CO2 de 5% en N2) et une configuration du haut-oxygène (O2 de 20% et CO2 de 5% en N2) sont les deux options utilisées généralement. L'utilisation de la configuration à faible teneur en oxygène a été particulièrement appropriée prouvé à 2 ou 3 cultures de jours, puisque la réduction de concentration en oxygène des niveaux atmosphériques a généralement amélioré le développement embryonnaire. Plus de problème complexe surgit exécutant les 5 cultures de jours. Pour ces applications, quelques études ont accentué de bonnes représentations de la configuration à faible teneur en oxygène tandis que d'autres travaux n'ont indiqué aucun vrai avantage.
Solution de MCQ pour le mélange de gaz.
Les travaux de littérature montrent que combien crucial la composition en mélange de gaz peut être en cultivant des embryons, et comment l'optimisation de l'atmosphère est toujours loin de l'réalistion. L'expérimentation entreprenante de culture d'embryon exige un instrument professionnel capable de mélanger les mélanges fortement précis de gaz et approprié pour la gestion dynamique. Pour ces applications, MCQ suggèrent l'utilisation de sa série de mélangeur de gaz, instruments conçus pour travailler avec la haute précision jusqu'à 6 mélanges de gaz de composants. Le MCQ assure une précision de 1% du de point de consigne, d'une répétabilité de 0,16% de la valeur de lecture et d'un temps de réponse rapide pour les changements de point de consigne (actuellement le plus rapide sur le marché). À la différence de la configuration de mélange de gaz standard, qui exige 3 simples canaux les contrôleurs d'écoulement de la masse se sont reliés à un boîtier de contrôle externe, le gaz
Les séries de mélangeur offrent tous les avantages de jusqu'à 6 contrôleurs à canal unique d'écoulement de la masse dans une boîte compacte, facilement pour manipuler et installer partout où elles ont eu besoin. Les séries de mélangeur de gaz n'exigent aucun boîtier de contrôle externe, pour tous les paramètres de mélange et d'autres arrangements de gaz peuvent être contrôlés par l'utilisateur avec le directeur de mélangeur de gaz de MCQ, le logiciel ont spécifiquement créé pour accéder à toutes les caractéristiques de mélangeur de gaz. Le logiciel exige seulement un bureau ou un ordinateur portable compatible avec tout ordinateur avec tous les systèmes effectifs de Windows à partir de Windows XP. Cette configuration matériel a besoin de peu de laboratoire-espace, particulièrement approprié prouvé aux applications de culture.
Configuration matériel
Un exemple de configuration matériel de série de mélangeur de gaz de MCQ est représenté dans le plan. Les gaz en service doivent être secs et non-agressifs. L'instrument fonctionne avec des médias purs ou de mélanges de gaz (l'exemple montre les gaz purs pour la simplicité). Les cylindres de gaz sont reliés à l'instrument par des tubes de 6 millimètres de diamètre et un clapet anti-retour est installé suivant chaque ligne en tant que dispositif de prévention de refoulement. Chaque gaz est relié et commandé par un canal consacré du mélangeur de gaz. Encore tube de 6 millimètres relie finalement l'instrument au système de travail (un capot de laboratoire générique pour la culture cellulaire) dans lequel l'expérience a lieu.