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Rôle du sténopé dans un microscope confocal

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Pourquoi un trou d'épingle est-il nécessaire ?

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Le trou d'épingle est la caractéristique déterminante d'un microscope Raman confocal, offrant des avantages majeurs en termes de résolution spatiale et de contraste d'imagerie par rapport à un microscope optique classique

Pourquoi un trou d'épingle est-il nécessaire ?

Lorsque la lumière laser est focalisée dans un échantillon par un microscope Raman, un volume d'excitation tridimensionnel est formé dans l'échantillon. Ce volume est connu sous le nom de fonction d'étalement du point d'excitation (PSF) et une représentation de sa forme est présentée sur la figure 1a. Lorsque la lumière converge vers le point focal, le diamètre de la PSF diminue, atteignant un diamètre minimum limité par la diffraction au plan focal, suivi d'une augmentation du diamètre lorsque la lumière diverge. La forme exacte du PSF dépend fortement des propriétés optiques de l'échantillon, telles que l'opacité à la longueur d'onde d'excitation, l'indice de réfraction et la façon dont il diffuse l'excitation incidente. La diffusion Raman se produira dans tout le volume d'excitation et la simple mesure du spectre Raman de cette excitation entraînerait donc des contributions spectrales de tout le volume avec une discrimination axiale (axe Z) limitée.